高危HPV持续感染与宫颈病变发生的相关性

[摘要] 目的 探討高危型人乳头状瘤病毒（HR-HPV）的感染状态与宫颈病变发生和发展之间的关系。 方法 选取1023名妇女接受液基细胞检查（TCT），第二代杂交捕获技术（HC2）-HPV-DNA和HPV分型检查。以TCT细胞学正常、高危HPV亚型阳性患者 181例作为目标人群，随访重复TCT细胞学检查和HPV基因分型，TCT细胞学异常的妇女在阴道镜下取宫颈组织细胞活检。分析在不同的HPV感染类型，TCT异常的感染状态（持续感染、间歇性感染和感染清除）和宫颈病理学异常的相关性。 结果 目标组随访1年，宫颈病变的发生率在HPV持续性感染和HPV感染清除或间歇性感染的女性之间没有显着性差异（P>0.05）。目标群体随访2年，持续性HPV感染女性比HPV感染清除或间歇性感染的女性宫颈病变的发生率高（P<0.05）。与单一类型感染相比，多发性HPV感染的宫颈病变发生率并不增高（P>0.05）。HPV16和HPV18感染发生率高，且宫颈病变发生率增高（P<0.05）。 结论持续HPV感染2年以上，特别是HPV16和HPV18持续感染，宫颈病变的风险显著增加。临床上，高危HPV分型和感染状态的联合筛查更具临床意义。

[关键词] 宫颈病变；HPV基因分型；持续性HPV感染；液基细胞TCT检测；HC2-HPV-DNA

[中图分类号] 737.33 [文献标识码] B [文章编号] 1673-9701（2017）10-0052-04

Relationship between persistent infection of high-risk HPV and occurrence of cervical lesions

LIANG Haiyan CHEN Xiaohong ZHANG Suwei

Reproductive Medicine Center， Shantou University Medical College First Affiliated Hospital， Shantou 515031， China

[Abstract] Objective To investigate the relationship between the infection status of high-risk human papillomavirus （HR-HPV） and the occurrence and development of cervical lesions. Methods A total of 1023 women underwent liquid-based cytologic test（TCT）， second-generation hybrid capture technique（HC2） -HPV-DNA and HPV typing. 181 patients with normal TCT cytology combined with high risk HPV subtypes were chonsen as the target population and underwent repeated TCT cytology and HPV genotyping in follow-up.And cervical tissue biopsy was taken under the colposcopy when TCT cytology was abnormal. The association between different HPV infection types， TCT abnormal infection status （persistent infection， intermittent infection and infection clearance） and the occurrence of cervical pathological abnormalities was analyzed. Results The target group was followed up for 1 year， and there was no significant difference in the incidence of cervical lesions between the HPV persistent infection women and HPV infection clearance or intermittent infection women（P>0.05）. The incidence of cervical cancer was higher in women with persistent HPV infection than that in women with HPV infection clearance or intermittent infection when the targeted group was followed up for 2 years（P<0.05）. Compared with that in a single type of infection， the incidence of cervical lesions in multiple HPV infection was not high（P>0.05）. The incidence of HPV16 and HPV18 infection was high， and the incidence of cervical lesions was increased（P<0.05）. Conclusion When persistent HPV infection for more than 2 years， especially continued infection of HPV16 and HPV18， the risk of cervical lesions increased significantly. Clinically， the combination screening of high-risk HPV typing and infection status is more of clinical significance.

[Key words] Cervical lesions； HPV genotyping； Persistent HPV infection； Liquid-based TCT ； HC2-HPV-DNA

流行病学调查表明高危型的人乳头瘤状病毒（HPV）感染与宫颈癌前病变有着千丝万缕的关联。然而感染了高危型HPV，并不代表一定发展成宫颈癌[1]。HPV作为一种性传播的病毒，常见于生活中。调查显示80%有过性生活的女性存在感染HPV的风险[2]。一过性感染或者间歇性感染HPV的女性在短期内，可以通过自身免疫系统的细胞免疫功能清除病毒，或者抑制病毒的发展。长期持續的感染HPV可以引起宫颈上皮瘤变（CIN）和子宫颈癌[3]。HPV感染（HPV清除、间歇性感染、持续感染）可能与宫颈病变甚至癌症相关，持续高危（HR）HPV感染是宫颈癌的发生和发展的必备条件[4]。所以，罹患宫颈癌风险的重要影响因素为是否存在持续的高危HPV感染。阐明HPV感染类型与宫颈病变之间的相互关系，对于临床预防、诊断以及鉴别诊断宫颈病变，对评估子宫颈病变的随访和预后而言都具有重要的指导意义。本研究通过四种检查手段（TCT、HC2-HPV-DNA、HPV-DNA、组织活检），对宫颈HPV感染亚型、HPV感染状态进行检测，并评价宫颈病变与宫颈感染高危HPV的感染状态之间的相互关系。

1 资料与方法

1.1一般资料

从2013年1月～2014年12月汕头大学医学院第一附属医院的门诊患者中，选取经妇检筛查证实为宫颈病变患者1023例为试验对象，收集病例的纳入标准为[5]：成年有性生活史女性，有宫颈疾变症状（主要为接触性出血、阴道分泌物异常、下腹痛、阴道异常流血等），排除其他系统肿瘤病例。在选取的1023例患者中181例TCT检测结果正常，但HC2-HPV-DNA检测和分类是高危型HPV（+）女性。且所有试验对象中有90例为单一型感染，有91例为多重感染。按感染HPV亚型分类，高风险HPV16阳性患者119例，HPV58阳性患者80例，HPV33阳性患者61例，HPV18阳性患者66例，HPV31阳性患者30例，HPV45阳性患者14例，HPV51阳性患者11例，HPV52阳性患者 29例，HPV56阳性患者11例。以上感染HPV患者中有部分为多重感染的患者。平均年龄（62.00±3.42）岁，无吸烟史，无HIV感染史及重大感染疾病史。随访2年。在第1年和第2年分别重复检测TCT和HPV类型。

HPV感染状态判定[6]：（1）持续性HPV感染：在目标人群中随访1～2年，随访样本复检感染HPV类型，至少存在一种HPV感染亚型与初次检测HPV亚型相同；（2）HPV感染状态清除：随访对象再次检测HPV为阴性；（3）HPV间歇性感染：随访对象，再次检测的阳性HPV亚型与初次检测结果不符。

1.2方法

1.2.1 TCT诊断标准[7] 用液基细胞刷刮取宫颈脱落细胞，收集于细胞保存液，制片后固定（95%乙醇），读片。以国机通用的TBS 2001分级系统作为判读的诊断标准，分别为鳞状上皮内病变（SIL）、非典型鳞状细胞（ASC-US）、无上皮病变或恶性病变（正常）、鳞状细胞癌（SCC）。如果TCT检测结果为HPV感染，则再取病变组织送病理活检。

1.2.2 HC2-HPV-DNA的检测亚型 刮取宫颈分泌物保存于细胞保存液，通过基因捕获技术（HC-2）检测高危人类乳头状瘤病毒（HPV-DNA）的16、18、31、33、 35、39、45、51、52、56、58、59、68亚型。

1.2.3 阴道镜活检 刮取病变最严重部位的宫颈组织进行活检，组织用10%的甲醛液保存并送病理活检。

1.3 统计学方法

采用SPSS16.0统计学软件进行统计分析。计数资料用χ2检验进行统计分析，P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 一般情况

在181例高危HPV阳性且液基细胞TCT检测正常患者中，接受2年随访患者159例，随访率为87.8%。

2.2 第1年随访结果及处理

共有181例患者按照随访要求进行了液基细胞TCT以及HPV分型检测，且液基细胞TCT结果异常者，在行阴道镜取活检送病理复检。

2.2.1 HPV-DNA分型复检结果 共有51例患者复检结果与原结果相同，即为持续感染，64例患者复检结果与原感染类型不同，即为间歇性感染，66例患者感染清除。

2.2.2 不同感染状态TCT及宫颈病理检测结果 （1）51例持续感染患者，检出LSIL 9例，ASC-US+AGC 10例，HSIL 3例。在结肠直肠病理检查中发现低级病变（CINI）4例和高级病变（CINⅡ-Ⅲ）1例。（2）64例间歇性感染患者，检出LSIL 14例，ASC-US+AGC 11例，HSIL 3例。宫颈组织活检，检出2例低级病变（CINⅠ）和1例高级病变（CINⅡ）。（3）66例感染清除者中，检出LSIL 10例，ASC-US+AGC 11例，无HSIL。宫颈活检检出1病例低度病变CINⅠ，未检出高度病变。且三组间差异经统计分析，差异无统计学意义（P>0.05）（表1）。

2.2.3 临床相应处理情况 随访对象第1年复检为低级别宫颈病变CINI，一般采取继续留观。高级病变CINⅡ以上者，一般给予LEEP或宫颈锥切治疗。治疗后定期复检TCT和HPV分型结果。

2.3 第2年随访结果

共159例患者接受了第2年随访。复检结果如下。

2.3.1 HPV-DNA分型复检结果 有32例患者存在持续感染，49例患者处于间歇性感染状态，78例患者处于感染清除状态。

2.3.2 不同感染状态TCT及宫颈病理检测结果 32例持续感染患者中，共有10例患者为LSIL；11例患者为ASC -US + AGC；9例患者为HSIL。宫颈活检检出10例宫颈上皮瘤变CINⅠ和3例宫颈上皮瘤变CINⅡ～Ⅲ；49例间歇性感染患者中，液基细胞TCT复检，共有8例患者为LSIL，有6例患者为ASC-US+AGC，2例患者为HSIL，宫颈活检结果显示：检出3例患者为宫颈上皮瘤变CINⅠ，1例患者为宫颈上皮瘤变CINⅡ；78例感染清除患者中，液基细胞TCT复检结果显示，3例患者为LSIL，1例患者为ASC-US+AGC， HSIL未检出，宫颈活检有1例患者为宫颈上皮瘤变CINⅠ，其余未检出。

2.3.3 第2年随访患者感染状态检测结果 持续2年随访的 HPV持续感染患者的TCT和宫颈病理异常率高于HPV感染清除或间歇性感染的患者（P<0.05）

2.3.4 感染因素与液基细胞TCT、组织活检结果之间的关系 单一感染和多重感染两者的TCT及宫颈病变检出率无显着差异（P>0.05）

2.3.5 HPV分型与持续感染状态之间的关系 高危型HPV16，18持续感染率较高。2年后随访较高的亚型是：HPV16、HPV18、HPV33、HPV58、HPV 56、HPV 52等

2.3.6 HPV类型和TCT以及宫颈病理异常 四个最常见的HPV类型中HPV（16、18、33、58），HPV16和HPV18的TCT异常率、宫颈病变发生率较高（P<0.05）

3 讨论

宫颈癌是发展中国家妇女中最常见的癌症，也是全球妇女中第二大常见癌症。全世界每年诊断出530 000个新的宫颈癌病例，占每年女性诊断出的新癌癥病例的9%。宫颈癌的总体五年存活率为68%[8]。然而，远端转移患者的5年生存率只有16%[9]。宫颈癌是唯一具有明确病因学的恶性肿瘤，并且在预防和治疗方面具有一些最好的前景[10]。

现已公认，人乳头瘤病毒（HPV）感染是子宫颈癌的主要病因[11]。高危型人乳头瘤病毒（HR-HPV）持续感染可引起子宫颈癌前病变-宫颈上皮内瘤变与宫颈癌。HPV的感染具有严格的组织特异性和宿主范围，人是HPV的唯一自然宿主，易患染区主要为皮肤和黏膜的表层，引起鳞状上皮的增殖性损伤[12]。在女性生殖道HPV感染者中，大多数病损可自行清退，常在8～13个月内自然清除，尤其是在首次发现的1年内清除率最高，只有少数感染持续存在并进展为宫颈癌[13]。据调查研究发现，感染HPV后大致有3种可能性的结局：①无明显的临床症状及形态学变化，以稳定的附加体潜伏在宿主内。②宫颈鳞状上皮增生感染活动期时HPV大量繁殖，使其转变为疣和乳头瘤等。③HPV基因组整合到宿主染色体的高危区，干扰了对高度致癌病毒基因的控制，从而引起恶性肿瘤[14]。HPV的感染分为潜伏感染期、亚临床感染期、临床症状期。

液基细胞学检查（TCT）常用于筛查子宫颈癌的研究。在大多数发展中国家中， HPV分型检测联用TCT检查检出率高，从而使宫颈癌的发病率降低约50%[15]。流行病学调查研究表明，宫颈癌的发病风险与是否存在高危型的HPV持续感染有关。持续感染高危型HPV的女性患者更容易发展成宫颈上皮瘤变CINII-III。其他感染HPV类型的患者在随访期间并没有发展成宫颈上皮瘤变CINII-III。可见持续感染高危型HPV在宫颈癌的发生发展中是一个非常重要的作用因素。其机制可能与反复的HPV感染刺激导致细胞化生转化，使得发展成原位宫颈癌的风险大大增加[16]。

同时，我们的研究结果也表明，持续性的高危HPV感染患者，随访两年后发现起罹患宫颈病变的患者比其他类型的感染高。间隔性感染或清除感染高危HPV感染患者发展成宫颈病变的风险低。多重的高危HPV感染与单一的HPV感染比较 多重性HPV感染并不具备更高的宫颈病变危险。 随访后复查的HPV基因分型可判断HPV感染的类型，区分是否存在高危HPV持续感染类型，有利于评估患者发展成宫颈癌的风险。

女性感染HPV后病变进展受所感染HPV具体亚型，感染的持续时间，女性感染HPV后发展成为宫颈癌与否还与具体的HPV亚型有关。本研究经过2年的随访，资料显示与其他亚型相比较而言，HPV16、HPV18两种高危亚型感染后更容易形成持续感染，进而发展成宫颈癌前病变。

[参考文献]

[1]Grandahl M，Rosenblad A，Stenhammar C，et al. School-based intervention for the prevention of HPV among adolescents：A cluster randomised controlled study[J]. BMJ Open，2016，6（1）：e009875.

[2]Yin L，Yao J，Chang K，et al. HPV Population Profiling in Healthy Men by Next-Generation Deep Sequencing Coupled with HPV-QUEST[J]. Viruses，2016，8（2）：E28.

[3]Li B，He Y，Han X，et al. Aberrant promoter methylation of SH3GL2 gene in vulvar squamous cell carcinoma correlates with clinicopathological characteristics and HPV infection status[J]. Int J Clin Exp Pathol，2015，8（11）：15442-15447.

[4]Hampson L，Maranga IO，Masinde MS，et al. A Single-Arm，Proof-Of-Concept Trial of Lopimune （Lopinavir/Ritonavir） as a Treatment for HPV-Related Pre-Invasive Cervical Disease[J]. PLoS One，2016，11（1）：e0147917.

[5]Luo H，Du H，Maurer K，et al. An Evaluation of the Cobas4800 HPV Test on Cervico-Vaginal Specimens in Liquid versus Solid Transport Media[J]. PLoS One，2016， 11（2）：e0148168.

[6]Depetrini E，Bonelli L，Ardoino S，et al. Cervical cancer screening with primary HPV-DNA test in the Local Health Authority 2 of Savona（Liguria Region，Northern Italy）：A population-based study[J]. Epidemiologia E Prevenzione，2016，40（3-4）：171.

[7]Ebrahim S，Mndende XK，Kharsany AB，et al. High burden of human papillomavirus（HPV） infection among young women in KwaZulu-Natal，South Africa[J]. PLoS One，2016，11（1）：e0146603.

[8]Aljunid S，Maimaiti N，Nur AM，et al. Cost-effectiveness of HPV vaccination regime：Comparing twice versus thrice vaccinations dose regime among adolescent girls in Malaysia[J]. BMC Public Health，2016，16（1）：71.

[9]Quinónez-Calvache EM，Ríos-Chaparro DI，Ramírez JD，et al. Chlamydia trachomatis Frequency in a Cohort of？HPV-Infected Colombian Women[J]. PLoS One，2016，11（1）：e0147504.

[10]Depetrini E，Bonelli L，Ardoino S，et al. Cervical cancer screening with primary HPV-DNA test in the Local Health Authority 2 of Savona（Liguria Region，Northern Italy）：A population-based study][J]. Epidemiologia E Prevenzione，2016，40（3-4）：171.

[11]Frega A，Verrone A，Manzara F，et al. Expression of E6/E7 HPV-DNA，HPV-mRNA and colposcopic features in management of CIN2/3 during pregnancy[J]. Eur Rev Med Pharmacol Sci，2016，20（20）：4236-4242.

[12]郭廣林. 液基细胞学配合阴道镜在宫颈病变筛查中的意义研究[J]. 中国医药导报，2013，（12）：46-48.

[13]Thakur RN. HPV-DNA testing for detecting precancerous lesions of cervix：How effective？[J]. 2016，5（1）：280.

[14]Arrossi S，Thouyaret L，Herrero R，et al. Effect of self-collection of HPV DNA offered by community health workers at home visits on uptake of screening for cervical cancer（the EMA study）：A population-based cluster-randomised trial[J]. Lancet Global Health，2015，28（2）：e85-e94.

[15]Luttmer R，Berkhof J，Dijkstra MG，et al. Comparing triage algorithms using HPV DNA genotyping，HPV E7 mRNA detection and cytology in high-risk HPV DNA-positive women[J]. Journal of Clinical Virology，2015，67：59-66.

[16]Castro FA，Koshiol J，Quint W，et al. Detection of HPV DNA in paraffin-embedded cervical samples：A comparison of four genotyping methods[J]. BMC Infectious Diseases，2015，15（1）：544.

（收稿日期：2017-01-14）

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