轮虫的培育条件和饵料基础研究进展
摘要 从温度、pH、光照周期、氨氮、溶氧及盐度6个方面探讨了作为渔业生产开口饵料的轮虫的培育条件的优化，从单胞藻、酵母、有机碎屑和细菌等方面探讨了轮虫各种饵料的优缺点，并对轮虫工厂化生产中存在的问题进行了分析。
关键词 轮虫；培育条件；饵料筛选
中图分类号 S963.21+4 文献标识码 A 文章编号 0517-6611（2014）26-09054-03
Research Progress on Culture Conditions and Food Elements of Rotifer
DENG Ping，ZHANG Sheng-yuan et al
（Wuhan Fisheries Science Research Institute， Wuhan， Hubei 430207）
Abstract The optimization of culture conditions of rotifer was discussed from 6 aspects of temperature， pH， photoperiod， ammonia nitrogen， dissolved oxygen and salinity. The advantages and disadvantages of dietary were discussed from aspects of algae， yeast， bacteria and detritus.The existing problems in production of rotifer were analyzed.
Key words Rotifer； Culture conditions； Food types
自1960年Ito发现褶皱臂尾轮虫（Brachionus plicatilis）是海水鱼类育苗的活饵料以来，轮虫作为鱼类和甲壳类的重要开口饵料在生产中广泛应用[1]。因轮虫营养丰富、适口性强、繁殖迅速、易于培养等特点，一直是水产动物育苗生产中大量培养的主要生物饵料之一。
影响轮虫培育的因素很多，但从批量生产来考虑，关键是轮虫的培育条件和饵料供应。笔者对近年来轮虫的培育条件和饵料供应方面的大量研究进行了综述，旨在为开展轮虫工厂化高密度生产奠定理论基础。
1 培育条件的优化
轮虫培育的最终目的是获取较高生物量的轮虫，培育条件必须有利于轮虫的无性繁殖，使种群能快速扩增。轮虫的培育条件主要包括温度、pH、光照周期、氨氮、溶氧及盐度等。
1.1 温度
温度是影响轮虫种群动态的关键因素之一。不同种类的轮虫，其种群增长的最适温度不同，同种轮虫不同品系间也存在差异。萼花臂尾轮虫不同品系种群增长的最适培养温度存在明显差异，青岛品系为32 ℃，武汉南湖水体轮虫的最适温度为35 ℃[2-3]。在25 ℃时，壶状臂尾轮虫的产卵量显著高于其他各温度下的产卵量，种群的净生殖率和内禀增长率最大[4]。裂足臂尾轮虫的净生殖率在15 ℃下最低，30 ℃下最高[5]。褶皱臂尾轮虫的最佳培育水温为28～30 ℃，最适繁殖温度为20～30 ℃[6]。方形臂尾轮虫在30 ℃时种群的内禀增长率和净生殖率达到最大值，平均世代时间最短[7]。
1.2 pH
pH也是影响轮虫种群增长的重要因素。萼花臂尾轮虫是广pH型种类，轮虫种群在pH 6.5～8.5增长较快，pH为8.5时，种群增长率最大[8]。殷旭旺等研究发现归属于耐碱类群的萼花臂尾轮虫、方形臂尾轮虫和角突臂尾轮虫的內禀增长率的最大值均出现在中性偏碱的pH范围内[9]。褶皱臂尾轮虫对pH的适应范围较广，pH适宜范围为6.0～9.0，最适pH为8.0～8.2。pH为7.5时，壶状臂尾轮虫增殖率最大，存活的pH范围为4.5～11.5[10]。
1.3 光照周期
轮虫在光照及全暗条件下都能生长繁殖，但有光照时生长更快。王金秋等研究发现光照对萼花臂尾轮虫的种群增长具有显著影响[11]。曾宪凯等报道褶皱臂尾轮虫适宜光照强度为4 400～10 000 lx[12]。刘文娟研究发现光照有利于壶状臂尾轮虫的生长繁殖[10]。
1.4 氨氮
氨氮是水产养殖中特别关注的一个环境因子。高密度培养萼花臂尾轮虫应调控氨态氮小于11 mg/L[13]。氨氮浓度小于3 mg/L不影响红臂尾轮虫的生殖[8]。褶皱臂尾轮虫对总氨氮可耐6～10 mg/L，但生活环境中的非离子氨不超过1 mg/L。
1.5 溶氧
高密度培养萼花臂尾轮虫应满足溶氧大于5 mg/L[13]。褶皱臂尾轮虫对溶氧的适应范围很广，在溶氧接近饱和状态（5～7 mg/L）时生长繁殖正常，在溶氧为2 mg/L时生长亦良好。
1.6 盐度
盐度是影响咸水轮虫种群增长和繁殖的重要因子之一。褶皱臂尾轮虫适盐范围广，最适盐度一般为15[14]。圆形臂尾轮虫的最适盐度为20[15]。壶状臂尾轮虫适宜的盐度范围为20～30，最适盐度为20[16]。
2 饵料的筛选
水生生态系统中，轮虫通常以藻类、有机碎屑及细菌为食。轮虫培养中所用饵料主要有单胞藻、酵母、有机碎屑和细菌等。
2.1 单胞藻
单胞藻因营养丰富、易培养，是轮虫批量培养的首选饵料。目前单胞藻作为轮虫饵料的研究主要集中在种类的选择、投喂密度及营养价值等方面。
杨家新研究发现投喂浓度为2.0×106 个/ml的蛋白核小球藻（Chlorella vulgaris），萼花臂尾轮虫平均产卵量较高，后代混交雌体百分率最低[17]。耿红等报道以浓度范围为3.0×106～15.0×106 个/ml的蛋白核小球藻为食物，萼花臂尾轮虫的种群增长率、体长和卵体积均随食物浓度的升高而增大[18]。Lürling等观测了10种不同藻类单独投喂对轮虫种群增长率的影响，结果发现斜生栅藻（Scenedesmus obliquus）组获得最大种群增长[19]。王金秋比较了5种藻对萼花臂尾轮虫的饵料效应，发现蛋白核小球藻和斜生栅藻最优[20]。席贻龙等报道了椭圆小球藻（C.ellipsoidea）作为淡水壶状臂尾轮虫最适饵料的密度范围为1.5×106～3.0×106 个/ml，最适密度是3.0×106 个/ml [21]。刘文娟发现当采用小球藻、转金属硫蛋白基因聚球藻（transgenic metallothionein Synechococcus sp.）、衣藻（Chlamydomonas sp.）、水华鱼腥藻（Anabaena flos-aquae）作为淡水壶状臂尾轮虫的饵料时，自然光照条件下小球藻的饵料效果优于其他3种微藻，黑暗条件下投喂衣藻的轮虫增殖效果最好[10]。
姚久祥等发现以亚心形扁藻（Platymonas subcordiformis）、绿色巴夫藻（Pavlova viridis）、小球藻单种或2种混合投喂褶皱臂尾轮虫，扁藻单种投喂或扁藻+小球藻混合投喂效果较好[22]。李磊研究了以单种微藻和混合微藻培养时褶皱臂尾轮虫摄食的动态变化。在12 h内轮虫对3种微藻的滤水率大小顺序为：球等鞭金藻（Isochrysis galbana）>小球藻>牟氏角毛藻（Chaetoceros muelleri Lermumerman）；轮虫对混合微藻的选择顺序为：球等鞭金藻>小球藻>牟氏角毛藻[23]。Zhou等研究了小球藻、青岛大扁藻（Plamonas helgolandicavar）、球等鞭金藻和小新月菱形藻（Nitzschia closterium）对褶皱臂尾轮虫摄食的影响，摄食率的顺序为：小球藻>大扁藻>球等鞭金藻>新月菱形藻，滤水率顺序为：大扁藻>新月菱形藻>小球藻>球等鞭金藻[24]。日本培养褶皱臂尾轮虫的主要饵料藻类为海水小球藻和眼点拟微绿球藻（Nannochloropsis oculata）。
除了考虑单胞藻的种类和密度外，藻类的营养价值也是饵料选择非常重要的方面。海水单胞藻中n-3系列不饱和脂肪酸（特别是EPA和DHA）含量丰富的藻类有三角褐指藻（Phaeodactylum tricornutum Bohlin）、小新月菱形藻、球等边金藻、小球藻、拟微球藻等。淡水单胞藻中小球藻、斜生栅藻、卵形隐藻（Cryptomonas ovata）、中型裸藻（Euglena intermedia）等都含有丰富的不饱和脂肪酸[20]。
2.2 酵母
面包酵母、啤酒酵母、油脂酵母和活性干酵母都可作为轮虫饵料，以面包酵母在轮虫的培养中应用最广泛。褶皱臂尾轮虫对面包酵母的日均摄食量以0.6～1.2 g/百万轮虫为宜[25]。王金秋等报道了投喂给萼花臂尾轮虫的面包酵母和啤酒酵母的最适密度分别为10×106和5×106 个/ml [11]。
2.3 有机碎屑
陈炜等比较了鸡粪浆及5种微藻对轮虫脂肪酸组成的影响，发现鸡粪轮虫具有较高的营养价值，HUFA含量达25.9%，EPA和DHA的含量分别为11.2%和4.4%，仅次于小球藻轮虫和小新月菱形藻轮虫[26]。日本利用微生物絮团培养轮虫也取得较好效果。Yin等利用海洋大型藻类制备的有机碎屑与拟微绿球藻搭配培养褶皱臂尾轮虫取得了与拟微绿球藻培养相同的种群增长[27]。
2.4 细菌
细菌是 VB12的主要来源，而 VB12是培养轮虫的必需营养物质。于秀玲发现小球藻培养液中的细菌对轮虫的生长有促进作用[28]。Nguyen等报道从轮虫培养系统隔离的微生物群落能明显促进酵母轮虫的增长[29]。Rombaut等报道从轮虫培养系统中分离的20株细菌中有5株明显提高了褶皱臂尾轮虫的繁殖率[30]。
除了从轮虫培养系统中分离得到的细菌外，还有应用商品化的益生菌。Planas等报道经乳酸菌强化培育的褶皱臂尾轮虫最大增长率和最大密度都明显高于仅以酵母为食的轮虫[31]。Douillet研究发现含有交替单胞菌的细菌添加剂能明显提高培养的褶皱臂尾轮虫和圆形臂尾轮虫的最大生长率[32]。王金秋等报道光合细菌能显著提高以面包酵母为食的萼花臂尾轮虫的种群增长[11]。
3 问题与展望
轮虫的培育条件和饵料供应已有大量研究，但在轮虫工厂化生产中仍存在一些关键性的问题需要解决：
①轮虫最适饵料的选择。不仅考虑饵料种类的影响，也应对混合饵料的作用加强研究。
②轮虫培养中的不稳定性和衰败现象仍是影响苗种规模化生产的瓶颈。应加强实验室条件下各理化参数对轮虫种群增长的综合研究，筛选出最适合轮虫种群增长的培育条件。
③国内外主要集中在海水轮虫工厂化高密度生产，淡水轮虫的发展相对滞后。结合淡水鱼类开口饵料的需求，开展淡水轮虫的工厂化高密度研究，建立有利于轮虫无性繁殖的强化培育模式。
④养殖池塘与工厂化生产的环境不同，饵料组成复杂，轮虫的营养效果有所不同。应加强室外生态池塘中饵料对轮虫营养效果的研究。
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